超高效液相色譜UPLC使得藥學工作者可以在更短的時間、更高的色譜分離度、更少的溶劑消耗下對中藥復雜樣品進行分析測定。UPLC在中藥的化學成分識別、指紋圖譜及代謝組學等分析領(lǐng)域逐步得到了應(yīng)用，促進了中藥的質(zhì)量評控。

超高效液相色譜UPLC與不同檢測器聯(lián)用在中藥分析中的應(yīng)用

1. UPLC與UV、ELSD聯(lián)用在中藥指紋圖譜與定量分析中的應(yīng)用

超高效液相色譜UPLC與不同檢測器聯(lián)用，可以對含不同化學類型的中藥進行研究，尤其是結(jié)合指紋圖譜技術(shù)在中藥質(zhì)量評價中顯示出了亮眼的優(yōu)勢。比較土茯苓藥材的UPLC-UV和HPLC-UV指紋圖譜，結(jié)果顯示HPLC需要75 min才能完成分析，而UPLC在10 min內(nèi)完成了色譜分離，大大節(jié)省了分析時間。采用UPLC-UV法對大黃中5種蒽醌衍生物進行分析測定，結(jié)果顯示HPLC需要30min才能完成分析，而UPLC在3min內(nèi)即完成色譜分離，分析效率提高了10倍。針對HPLC難以分離的紅參類藥材，開展了基于UPLC-UV的紅參研究，得到了高分離度和高純度的色譜指紋圖譜，該研究建立的方法具有專屬性強、分離度高、色譜峰純度高的特點，可用于人參類藥材的品種鑒定和質(zhì)量控制。

針對一些含皂苷類或化學成分無紫外吸收的中藥，UPLC-ELSD則優(yōu)勢盡顯。采用UPLC-UV-ELSD法對6個產(chǎn)地28個批次西洋參藥材的指紋圖譜進行聚類分析、主成分分析及相似度評價等研究，為西洋參藥材的品質(zhì)評價提供了參考方法。建立了UPLC-ESLD法同時測定北柴胡藥材中柴胡皂苷a、c、d的含量，是評價北柴胡藥材質(zhì)量的一種較好的方法。建立超聲輔助固液萃取與UPLC-ELSD相結(jié)合同時提取和測定天然牛黃和替代品中6種膽汁酸含量的方法，測定結(jié)果顯示，這些樣品的內(nèi)在質(zhì)量存在一定差異。利用UPLC-ELSD指紋圖譜分析和測定生物堿來研究貝母硫熏蒸過程的潛在破壞作用，該研究表明硫熏蒸對樣品中的主要活性成分損失較大。

2. UPLC與UV、ELSD聯(lián)用在中成藥指紋圖譜與定量分析中的應(yīng)用

由于中成藥的化學成分比單味藥材的化學成分更加復雜，常規(guī)HPLC往往在較短的時間內(nèi)很難獲得分離度較高的色譜圖，超高效液相色譜UPLC的高分離度幫助藥學工作者可以更好地應(yīng)對分離中成藥中復雜成分的挑戰(zhàn)。利用UPLC-UV對益*草顆粒和益*草膏中的益母草堿進行了含量測定，進一步完善了益母草制劑的質(zhì)量控制方法。運用UPLC-UV對葛根芩連湯中11種成分進行了含量測定，結(jié)果表明新建立的質(zhì)控方法具有更好的質(zhì)量評控力。運用UPLC-UV比較了三七原料藥和顆粒劑中5種成分的含量差異，定性、定量地評價了三七不同產(chǎn)品的質(zhì)量信息，獲得比較滿意的結(jié)果。建立UPLC-DAD-ELSD切換波長法并應(yīng)用于酸棗仁顆粒中8種成分的含量測定，對酸棗仁顆粒的質(zhì)量控制評價提供了參考方法。利用UPLC-UV建立了復方芪麻膠囊的指紋圖譜，并定量測定了8種成分，建立了該制劑一種比較全面的質(zhì)量評價方法。利用UPLC-UV建立了葛*芩*丸的指紋圖譜及7種成分的定量測定方法，與之前單一質(zhì)控標準相比，提升了其質(zhì)量控制水平。

3. UPLC與MS聯(lián)用在中藥/中成藥成分辨識中的應(yīng)用

超高效液相色譜UPLC與質(zhì)譜（mass spectrometer，MS）檢測器聯(lián)用可以改善質(zhì)譜檢測結(jié)果的質(zhì)量。由于低流速下色譜峰擴散較小，增加了峰濃度，有利于提高離子源的效率。同時UPLC強大的分離能力有助于目標化合物和與之競爭電離的雜質(zhì)峰的分離，從而使MS的靈敏度由于離子抑制現(xiàn)象的減弱而得到進一步的提高。故UPLC與MS聯(lián)用可以獲得靈敏度更高、質(zhì)量更好的信息，在提高分離效能、縮短分析時間的同時大大提高了檢測靈敏度，有利于中藥或中成藥中復雜成分的分析。

運用UPLC-Q-TOF-MS快速分析了人參根中的皂苷類化合物，共鑒定出27種化合物，新建立的方法成功地應(yīng)用于分析同一產(chǎn)地、不同生長時間的人參干燥主根中皂苷的差異。運用UPLC-Q-TOF-MS對未加工和加工的黃連進行了化學成分分析，共鑒定出了13種化合物，其中有3種是初檢測出，結(jié)合主成分分析結(jié)果表明2種不同加工方式的黃連化學成分存在顯著差異。在參*扶正注*液中運用UPLC-ESI-Q-TOF- MS/MS分離鑒定了81個主要成分，包括有機酸、氨基酸、寡糖和生物堿等，為該制劑的質(zhì)量評控奠定了基礎(chǔ)。建立了HPLC-Q-TOF-MS快速鑒定三葉青化學成分的方法，并用UPLC-Q-MS測定三葉青中4種成分的含量，結(jié)果表明建立的UPLC-Q-MS定量分析方法快捷、準確，為綜合評價三葉青的質(zhì)量提供參考。運用UPLC- DAD-Q-TOF-MS對連**瘟膠囊的主要成分進行定性、定量分析，通過比較保留時間和精確質(zhì)量測定及參考化合物或文獻數(shù)據(jù)，初步確定了包括類黃酮、苯丙素類、蒽醌類、三萜類等61種化合物。運用UPLC-Q-TOF-MS分析了不同產(chǎn)地泥附子的化學成分差異，為從次生代謝產(chǎn)物多樣性揭示附子道地性的形成機制提供了新的參考。運用UPLC-Q-TOF-MS對3種不同種類升麻的化學成分進行快速分析，共鑒定出32種共有組分以及8種不同成分，為進一步研究3個不同品種的升麻提供了參考。運用UPLC-TQ-MS法研究了丹*軟膠囊中不同活性成分的溶出規(guī)律，為該中成藥的質(zhì)量評控提供了參考。

4. UPLC與MS聯(lián)用在中藥代謝組學分析中的應(yīng)用

代謝組學是目前研究中藥藥理作用機制和發(fā)現(xiàn)活性成分的手段之一，UPLC-MS技術(shù)為中藥代謝組學分析提供了技術(shù)平臺。超高效液相色譜UPLC可與多種類型的質(zhì)譜串聯(lián)，高分辨質(zhì)譜包括飛行時間（TOF）、四極桿-飛行時間（Q-TOF）、串聯(lián)飛行時間（TOF-TOF）及離子阱-飛行時間（IT-TOF）質(zhì)譜等。UPLC與高分辨質(zhì)譜串聯(lián)可應(yīng)用于中草藥非靶向代謝組學的研究，尤其是UPLC-Q-TOF/MS能夠更好地用于代謝物和同分異構(gòu)體的分離鑒定。此外，UPLC還可與三重四級桿或四極桿離子阱（Q-IT）等串聯(lián)應(yīng)用于中藥靶向代謝組學分析。目前，新型的串聯(lián)質(zhì)譜如四極桿線性離子阱（Q-Trap）質(zhì)譜由于具有較強的定性和定量能力，與UPLC聯(lián)用在中藥非靶向代謝組學及靶向代謝組學方面逐漸得到應(yīng)用。研究嶺南山竹子Garcinia oblongifoliaChamp.ex Benth. 的葉、枝和果實的比較代謝譜和生物活性，使用UPLC-Q-TOF/MS共鑒定了40種化合物，結(jié)合化學計量學分析，揭示了所研究的3種植物代謝物譜的變化和生物活性差異相關(guān)聯(lián)，表明UPLC-Q-TOF/MS可用于鑒定在單個物種的不同部位中差異表達的生物活性成分。提出了一種基于目標糖組學和非靶向代謝組學策略的綜合色譜技術(shù)，利用UPLC-ESI-Q-TOF- MS/MS同時分離鑒定地黃的碳水化合物和次級代謝物取得了成功，并進一步闡明了碳水化合物和次級代謝產(chǎn)物的化學轉(zhuǎn)化機制，從而揭示了碳水化合物和次生代謝產(chǎn)物之間固有的化學聯(lián)系。利用UPLC-MS背景扣除法聯(lián)合代謝組學技術(shù)研究了柴胡-白芍藥對配伍前后化學成分的整體變化情況，從整體化學組成上比較了柴胡-白芍藥對配伍前后的差異，為其配伍機制的闡釋奠定了基礎(chǔ)。利用基于超高效液相色譜/電噴霧電離synapt高清質(zhì)譜（UPLC/ESI-SYNAPT-HDMS）結(jié)合模式識別方法研究了酸棗仁湯治療失眠癥的代謝特征和治療效果，鑒定出20種離子作為“分化代謝物”，結(jié)果表明酸棗仁湯的治療效果可能通過5-羥色胺能激活介導實現(xiàn)，該研究結(jié)果還表明UPLC/ESI-SYNAPT-HDMS技術(shù)可用于中藥的代謝物分析，開辟了使用代謝組學解決特殊中藥問題的新視角。利用UPLC/LTQ-Orbitrap-MS技術(shù)對復方祖*麻片抗類風濕關(guān)節(jié)炎的血漿代謝組學進行研究，結(jié)果表明復方祖*麻片主要通過下調(diào)繼發(fā)性病變期溶血磷脂酰*堿的水平而達到治療效果。

由于樣品組分的分離在先，離子化和檢測在后，因而能夠有效地減少干擾，諸如基質(zhì)效應(yīng)、離子化抑制、離子化競爭等，大幅度增加代謝物的鑒別數(shù)量和準確度。UPLC-MS除了分析速度快、樣品無需衍生化等優(yōu)點，UPLC的高分離度使得峰寬變窄、信噪比增強，從而提高了生物樣品分析的選擇性和靈敏度。因此，與傳統(tǒng)HPLC相比，UPLC能獲得中藥更多代謝物的信息，對于復雜生物樣品的分離具有顯著優(yōu)勢，UPLC與MS聯(lián)用在中藥代謝組學研究中將發(fā)揮越來越重要的作用。

5. UPLC與MS聯(lián)用在中藥真菌毒素分析中的應(yīng)用

目前中藥的安全性檢測受到越來越多的關(guān)注和研究，但是中藥含有真菌毒素往往是微量（1～100 μg/g）、痕量（0.01～1 μg/g）級別，常規(guī)分析手段往往很難到達檢測限和定量限。超高效液相色譜UPLC與MS聯(lián)用帶來的高靈敏度幫助藥學工作者可以很好地定量分析中藥中的真菌毒素。建立了一種基于QuEChERS-UPLC-Q-MS/MS法定量測定白茅根中16種真菌毒素，充分利用UPLC的高分離度，獲得了較好的結(jié)果。建立了UPLC-MS/MS法同時測定麥芽中11種真菌毒素的污染水平，通過相同保留時間處的特征離子二級碎片排除了假陽性結(jié)果，檢測限和定量限分別為0.05～30.00 μg/kg和0.15～87.50 μg/kg，表明該方法可以準確、靈敏、快速地監(jiān)測麥芽受真菌毒素污染的狀況。使用UHPLC-MS/MS法測定淡豆豉、麥芽、薏苡仁和酸棗仁中黃曲霉毒素的含量，結(jié)果顯示不同藥材的黃曲霉毒素G2、G1、B2、B1的檢出限分別為0.04～0.1 μg/kg、0.01～0.02 μg/kg、0.01～0.03 μg/kg和0.02～0.03 μg/kg，表明了該方法具有較高的靈敏度。采用UPLC-MS/MS法對三七、黨參和柴胡中的黃曲霉毒素進行了檢測，該研究表明分離條件對分離結(jié)果有一定影響，3種藥材中曲霉屬真菌的污染值應(yīng)得到重視。建立了一種基于ESI-LC/MS同時檢測三七藥材中10 種真菌毒素方法，結(jié)果表明該方法凈化效果好、靈敏度高、重復性好，適用于成分復雜的三七藥材中多種真菌毒素的定量檢測。對決明子、菟絲子、薏苡仁等12種藥材種子中黃曲霉毒素G2、G1、B2、B1和赭*霉*素A進行了測定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2和赭*霉*素A在12種藥材種子中的檢出率較低，但一旦檢測到即為高水平。實現(xiàn)快速、準確地同時測定多種真菌毒素一直是中草藥分析領(lǐng)域的熱點和難點，UPLC-MS/MS聯(lián)用技術(shù)將會越來越多地應(yīng)用于中藥的真菌毒素分析。

在實際應(yīng)用中由于UPLC使用的色譜柱柱填料較小，為防止堵塞，樣品前處理要求更加嚴格。超高效液相色譜UPLC是在HPLC的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的，由于UPLC能夠提高色譜分離度、縮短分析時間、提高分析效率、節(jié)省溶劑消耗，同時提供智能化的分析，確保分析數(shù)據(jù)的可靠性和高效率，因此將成為中藥分析領(lǐng)域的主要分析手段，其應(yīng)用將會越來越多。